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630 分子生物学原理
一、 考试内容范围
1 )核酸的结构与功能
核酸的化学组成, DNA 与 RNA 的异同。核酸序列及其表示方法,顺向、反向重复序列。 DNA 双螺旋结构,包括 B 、 A 、 Z 型 DNA ,三和四股螺旋结构, RNA 短双螺旋结构。核酸的变性、复性、变性曲线, Tm 值。分子杂交。
阐明 DNA 、 RNA 生物学功能的依据和重要的实验现象。
2 ) . 遗传信息的传递
DNA 及 RNA 在遗传信息贮存和传递中的功能,其实验依据。遗传信息传递的中心法则。 DNA 复制合成的详细机理及实验依据,包括涉及的酶类,复制的半保留性,方向性,不连续性,复制起点,复制引物,解螺旋,拓朴异构,复制的时间性,复制的类型,复制子等概念。真核和原核 DNA 复制的异同。 DNA 复制的抑制剂。
DNA 的反转录合成的发现及其意义。反转录酶。
RNA 的转录合成详细机理,包括 RNA 聚合酶的亚基组成及功能;转录的不对称性,选择性;有意义链和反义链概念;转录的起始,延长和终止;起动子、终止子序列特点和作用, ρ 因子作用。转录子概念, RNA 转录后的加工修饰。真核和原核生物 RNA 转录合成的异同。 RNA 转录合成的抑制剂。
涉及蛋白质生物合成的 mRNA 、 rRNA 及 tRNA 的种类,细胞内含量,生物合成结构,代谢特点。直核和原核生物中这三种 RNA 结构,代谢和生物合成的异同。断裂基因,内含子、外显子等概念; mRNA 的拼接, 5' 端帽, 3' 端 polyA 尾形成机理。单拷贝及多拷贝基因。核糖体的结构,大小亚基及其功能, r-RNA 的转录合成及其成熟过程,核糖体的组装。 tRNA 的转录合成及其加工成熟, tRNA 的三叶草结构及其各部分功能。
遗传密码的发现及其实验依据,遗传密码的特点,包括氨基酰 -tRNA 合成酶的作用,起始复合物形成,翻译的起始,延长,终止过程及各因子的作用,能量的消耗及 GTP 的作用, mRNA ,核糖体和 tRNA 的相互作用及功能。核糖体循环。多聚核糖体。真核与原核生物蛋白质翻译合成的异同。蛋白质合成抑制剂。
肽链翻译后的加工修饰,包括共价修饰(切除、甲基化、糖基化、磷酸化等),三维结构等。
3 ) .DNA 的损伤,修复与突变
导致 DNA 损伤的物理、化学和生物因素。自发性和环境因素对 DNA 的损伤。 DNA 损伤的各种类型。 DNA 损伤的修复包括光修复、切除修复、重组修复、 SOS 修复等。
突变的类型。突变的效应。
4 )病毒基因组的结构与功能
病毒核酸结构一般特点。病毒核酸分类。重点举例阐明噬菌体( Qβ 、 φ×174 、 M13 、 T 和 λ 噬菌体等) DNA 病毒( SV40 ,乙型肝炎病毒等), RNA 病毒(脊髓炎白质炎、出血热、流感、逆转录病毒等)的基因组结构,基因的表达调控及病毒与宿主的相互作用。明确噬菌体的病毒基因整合,转导作用,前病毒,增强子,溶原菌等概念。
5 ) . 原核生物基因组的结构与基因表达调控
原核生物染色体的类核结构。以大肠杆菌为例说明,细菌的基因组结构。
操纵子系统及其实验证据。组成酶、适应酶、顺反子、结构基因、操纵基因、起动子、调控基因、终止子、衰减子、阻遏作用、诱导作用、代谢物阻遏作用、操纵子、调节子等概念。操纵子正、负调控的几种类型,重点举例(乳糖操纵子、色氨酸操纵子等)说明。
质粒的特点,功能,分类及转移。阐明质粒( F )、抗药性质粒( R )及 Col 质粒。
可移动的基因成分及其种类:插入顺序( IS ),转座子和可转座的噬菌体。转位作用的机理,转位的遗传效应。
基因重组的类型。同源重组的特征和分子机理,重组涉及的基因和酶类。
6 ) . 真核生物的基因组与基因表达调控
真核基因与原核基因中的非编码顺序及重复顺序的几种类型, DNA 复性动力学分析,真核基因家族的类型,真核基因表达的调控,特别是转录水平的表达调控,包括顺式调控元件中的启动子,增强子,沉默子,反应元件。反式作用因子,转录因子的几种结构等。真核基因组的转位因子。
真核生物染色体的组成及结构。组蛋白的特点、种类及其作用。非组蛋白的性质、成分及作用。核小体和染色体的高层次结构。染色质结构与基因的可能关系。
人及哺乳动物基因组的大小,重复序列和基因家族。人基因定位。重点举例人珠蛋白基因族,免疫珠蛋白基因族,组蛋白基因组, rRNA 和 tRNA 基因族的组成,结构,功能和表达调控,阐明癌基因、原癌基因、病毒癌基因、细胞癌基因和抑癌基因的概念,癌基因的激活方式。
人类基因组研究计划及进展。
7 ) . 基因工程
生物工程、基因工程、 DNA 重组技术的概念。基因工程的基本步骤。
限制性核酸内切酶及基因工程常用的工具酶。
基因工程载体的应有性质及其类型:质粒,噬菌体及病毒载体,举出常用实例。
制备目的基因的几种途径。基因文库。 CDNA 基因文库。
DNA 分子的连接、重组、转化及导入宿主细胞。 DNA 重组体的筛选和检测。
核酸序列分析的基本原理与方法。
克隆基因的表达。真核和原核的表达载体。
转基因动物。基因诊断的技术与方法。基因治疗的概念,主要内容和策略。
重组 DNA 和基因工程技术在生物中的应用和安全问题。
8 )分子生物学研究历史上的重大事件及其相关的背景。
二、 考题的形式
名词解释、概念阐述、简答题和论述题、填空和判断分析。
三、主要参考教材和书籍:
《现代分子生物学学》(第三版)朱玉贤、李毅 主编 高等教育出版社 2002 。
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